• ½Íĸ˫ÔÓ½»

    ½Íĸ˫ÔÓ½»ÏµÍ³£¨Yeast Two-Hybrid Technique£©ÊÇÓÉFieldsºÍSongÌá³öµÄ£¬ÔÚ½ÍĸÖÐÑо¿µ°°×¼äÏ໥×÷ÓõÄÒ»Öַdz£ÓÐЧµÄ·Ö×ÓÉúÎïѧ·½·¨£¬ÒÔÆä¼ò±ã¡¢ÁéÃô¡¢¸ßЧÒÔ¼°ÄÜ·´Ó³µ°°×¼äÔÚ»îϸ°ûÄÚµÄÏ໥×÷ÓõÈÌØµãµÃµ½¹ã·ºÓ¦ÓᣵÂÌ©ÉúÎïÓµÓк˵°°×¼°Ä¤µ°°×½Íĸ˫ÔÓ½»Ë«ÖØÌåϵ£¬Ìṩ´Ó½ÍĸÎĿ⹹½¨£¬½ÍĸÎÄ¿âɸÑ¡£¬µã¶Ôµã½Íĸ˫ÔÓ½»Ñé֤һվʽ·þÎñ£¬¾­Ñé·á¸»£¬×¨Òµ¼¼ÊõÈËÔ±Ò»¶ÔÒ»ÌṩΪÄú½â´ðÒÉÎÊ¡£

    ·þÎñÓÅÊÆ

    • ¸ßÁéÃô¶È£¬¿ÉÒÔ¼ì²â˲ʱ/ÈõÏ໥×÷Óã»
    • ÉúÀí»·¾³Ä£Äâ£¬ÕæºË±í´ïϵͳÖмì²â»îϸ°ûÄÚµÄÏ໥×÷Óã»
    • ÓµÓкË/Ĥ½Íĸ˫ÔÓ½»ÏµÍ³£¬¸²¸Ç²»Í¬µ°°×ÀàÐÍ£»
    • ·á¸»½¨¿â¾­Ñ飬֧³Ö¸ßͨÁ¿ÎÄ¿âɸѡ¡£

    ·þÎñÔ­Àí

    ºË½Íĸ˫ÔÓ½»ÏµÍ³

    ºË½Íĸ˫ÔÓ½»ÏµÍ³ÊÊÓÃÓÚ¿ÉÈÜÐÔµ°°×¡¢ºËÄÚµ°°×»¥×÷Ñо¿£¬ÊǸù¾ÝÕæºËת¼µ÷¿ØµÄÌØµãÉè¼ÆµÄ¡£ÕæºËÉúÎïת¼Òò×Óº¬ÓÐÁ½¸öÏà¶Ô¶ÀÁ¢µÄ¹¦ÄÜÇøÓò£ºDNA½áºÏ½á¹¹Óò£¨DNA binding domain, DBD£©ºÍת¼¼¤»î½á¹¹Óò£¨activation domain, AD£©¡£µ±DBDÓëAD¶þÕßÔÚ¿Õ¼äÉϳä·Ö½Ó½üʱ£¬Ôò³ÊÏÖÍêÕûת¼Òò×ÓµÄת¼¼¤»î»îÐÔ¡£½«DBDÓëÒÑÖªµÄµ°°×X£¬ÓÖ³ÆÎªÓÕ¶üµ°°×£¨bait£©Èںϣ¬ADÓë´ýÑо¿°Ðµ°°×Y£¨prey£©»òcDNAÎÄ¿âÈںϣ¬µ±µ°°×XºÍYÏ໥×÷ÓÃʱ£¬DBDÓëADÔÚ¿Õ¼äÉϽӽü£¬¼¤»îÏÂÓα¨¸æ»ùÒò£¨ÈçHIS3/ADE2/LacZ£©£¬¿Éͨ¹ýÓªÑøÈ±ÏÝɸѡ»òÏÔÉ«·´Ó¦Åжϻ¥×÷¡£

    ºË½Íĸ˫ÔÓ½»ÏµÍ³»ù±¾Ô­Àí

    Fig1. ºË½Íĸ˫ÔÓ½»ÏµÍ³»ù±¾Ô­Àí

    Ĥ½Íĸ˫ÔÓ½»ÏµÍ³

    Ĥ½Íĸ˫ÔÓ½»ÏµÍ³ÊÊÓÃÓÚĤµ°°×¡¢¿ÉÈÜÐÔµ°°×»¥×÷Ñо¿£¬Í¨³£Ê¹Ó÷ÖÁÑ-·ºËØÏµÍ³£¨split-ubiquitin system£©¡£·ºËØÊÇÒ»¶ÎÄÜÓëµ°°×½áºÏ²¢½éµ¼µ°°×½µ½âµÄ¶ÌëÄ¡£¶à¸ö·ºËØ·Ö×Ó¹²¼Û½áºÏµ½°Ðµ°°×ÉÏÐγɶà¾Û·ºËØÁ´£¬·ºËØÌØÒìÐÔµ°°×øÒÔÒ»ÖÖ26Sµ°°×ø¸´ºÏÌåµÄÐÎʽʶ±ð²¢½µ½â°Ðµ°°×£¬Í¬Ê±½«·ºËØÊÍ·ÅÖÁ°ûÖÊ£¬½øÈëÏÂÒ»ÂÖÑ­»·¡£·ÖÁÑ-·ºËØÏµÍ³ÕýÊǽ¨Á¢ÔÚÕâÒ»ÌØÐÔÖ®ÉϵÄ¡£ÔÚ¸ÃϵͳÖУ¬ÒÑÖªµ°°×XÓë·ºËØC¶ËµÄÒ»¶Î¶àëÄ£¨Cub£©Èںϱí´ï£¬´ýÑо¿°Ðµ°°×YÓë·ºËØN¶ËÒ»¶Î¾­¹ýÐÞÊεĶàëÄ£¨NubG£©Èںϱí´ï¡£ÐÞÊÎʹµÃ·ºËØN¶ËµÄ¶àëIJ»ÄÜÕýÈ·ÕÛµþ£¬´Ó¶øÊ¹ÆäÎÞ·¨Óë·ºËØC¶ËµÄ¶àëĽáºÏÐγÉÍêÕûµÄ·ºËØ¡£Èç¹ûµ°°×XÓëµ°°×Y´æÔÚÏ໥×÷Ó㬴ø¶¯CubºÍNubÔÚ¿Õ¼äÉϽӽü£¬ÐγÉÍêÕû·ºËØ·Ö×Ó£¬Ê¹µÃUBPs¿ÉÒÔʶ±ð²¢½«·ºËØÓëÈںϱí´ïµÄת¼Òò×Ó·ÖÀ롣ת¼Òò×Ó½øÈëºËÄÚ£¬½øÒ»²½Æô¶¯±¨¸æ»ùÒòµÄ±í´ï¡£

    Ĥ½Íĸ˫ÔÓ½»ÏµÍ³»ù±¾Ô­Àí

    Fig2. Ĥ½Íĸ˫ÔÓ½»ÏµÍ³»ù±¾Ô­Àí

    ·þÎñÄÚÈÝ

    ½ÍĸÎĿ⹹½¨Óëɸѡ·þÎñ£¨Gateway·¨£©

    ·þÎñ½×¶Î ·þÎñÄÚÈÝ ÖÜÆÚ ¿Í»§Ìṩ ½»¸¶
    ÑùÆ·RNAÌáÈ¡£¨¿ÉÑ¡£©
    • ÑùÆ·×¼±¸
    • RNAÌáÈ¡
    • mRNA·ÖÀë
    2ÖÜ
    • ¶¯Ö²Îï×éÖ¯/ϸ°û/×ÜRNA*
    • »ùÒòÐòÁÐ/µ°°×ÐòÁÐ/ÖÊÁ£
    • ³õ¼¶ÎÄ¿âÖÊÁ£ 200ug
    • ³õ¼¶ÎÄ¿â¾úÒº*3¹Ü
    • ´Î¼¶ÎÄ¿âÖÊÁ£ 200ug
    • ´Î¼¶ÎÄ¿â¾úÒº*3¹Ü
    • ÓÕ¶üÖÊÁ£
    • ÏîÄ¿±¨¸æ
    cDNAÎĿ⹹½¨
    • cDNAºÏ³É
    • ³õ¼¶ÎĿ⹹½¨
    • ´Î¼¶ÎĿ⹹½¨
    5ÖÜ
    ÔØÌå¹¹½¨
    • ÓÕ¶ü»ùÒòA»ùÒòºÏ³É£¨¿ÉÑ¡£©
    • Ñǿˡ
    2~3ÖÜ
    ½Íĸ¾úÖêת»¯
    • ½Íĸ¾úÖêת»¯
    • ×Ô¼¤»î¼ì²â
    • ¶¾ÐÔ¼ì²â
    2~3ÖÜ
    ×Ô¼¤»îÒÖÖÆ£¨¿ÉÑ¡£©
    • ×Ô¼¤»îÒÖÖÆ
    1ÖÜ
    ÎÄ¿âɸѡ
    • ³õɸ
    • ¸´É¸
    • ÑôÐÔ¿Ë¡¼ø¶¨
    2ÖÜ
    ÑôÐÔ¿Ë¡²âÐò
    • ɸѡ½á¹û²âÐò
    • Êý¾Ý·ÖÎö
    1ÖÜ
    »Ø×ªÑéÖ¤
    • »Ø×ªÑéÖ¤
    1ÖÜ

    *ÑùÆ·ËÍÑùÒªÇó£ºÏ¸°û£¨¡Ý108 cells£©£»Ö²ÎïҶƬ×éÖ¯£¨¡Ý4 g£©£»Ö²Îï¸ù¾¥»òÖÖ×Ó£¨¡Ý8 g£©£»¶¯Îï×éÖ¯£¨¡Ý1 g£©£»×ÜRNA£¨¡Ý200 ¦Ìg£©£¬ËùÓÐÐèÒª³éÌáRNA»òRNAÑù±¾Ðè¸É±ùÔËÊä¡£

    ½Íĸ˫ÔÓ½»ÑéÖ¤·þÎñ£¨ºËÌåϵ/ĤÌåϵ£©

    ·þÎñ½×¶Î ·þÎñÄÚÈÝ ÖÜÆÚ ¿Í»§Ìṩ ½»¸¶
    ÔØÌå¹¹½¨
    • ÓÕ¶ü»ùÒòA/ÁÔÎï»ùÒòB»ùÒòºÏ³É£¨¿ÉÑ¡£©
    • ·Ö±ðÑǿˡÖÁÏàÓ¦ÔØÌå
    2~3ÖÜ
    • »ùÒòÐòÁÐ/µ°°×ÐòÁÐ/ÖÊÁ£
    • ±í´ïÖÊÁ£
    • ²âÐò±¨¸æ
    • »¥×÷¼ì²â±¨¸æ
    • ԭʼͼƬ
    ½Íĸ¾úÖêת»¯
    • ½Íĸ¾úÖêת»¯
    • ×Ô¼¤»î¼ì²â
    • ¶¾ÐÔ¼ì²â
    2~3ÖÜ
    Ï໥×÷ÓÃÑéÖ¤
    • »¥×÷ÑéÖ¤£¨°üº¬ÒõÐÔ¶ÔÕÕ/ÑôÐÔ¶ÔÕÕ£©
    2~3ÖÜ

    Ïà¹Ø·þÎñ

    Ïà¹ØÔĶÁ

    Á¢¼´Ñ¯¼Û
    • ÐÕÃû

    • µ¥Î»

    • µç»°

    • ×ÉѯÏîÄ¿

    • ÑéÖ¤Âë

    • ÁôÑÔ:

    ¡¾ÍøÕ¾µØÍ¼¡¿¡¾sitemap¡¿
    ¡¾ÍøÕ¾µØÍ¼¡¿¡¾sitemap¡¿